新冠病毒核酸检测试剂注册技术评审要点:假病毒可作为质控对照品

假病毒颗粒

假病毒粒子通常是将对人没有危害的噬菌体(细菌病毒)进行改造，使其基因组含有人类致病病毒的基因片段。这样致病病毒的特定基因片段就会存在于噬菌体(细菌病毒)中，模拟病毒真实状况但对人又没有感染性。与活病毒相比，利用假病毒进行试验安全性较高，这也有助于防止病毒从实验室传播出来。

假病毒颗粒在新型冠状病毒诊断试剂开发中的作用

对于检测试剂来说，进行质控检验所使用的参考品至关重要:参考品的性能与待检样本越接近，越能够准确地体现试剂在临床使用中的真实效果。假病毒RNA即装甲RNA，可最大程度地模拟RNA病毒，又具有绝对的生物安全属性和可靠的稳定性，是理想的RNA病毒核酸检测试剂的阳性对照物质，可以全程监控病毒RNA提取，逆转录和扩增各步骤，既可用于试剂盒的性能评价，也是厂家制备标准品的关键原材料。

《2019新型冠状病毒核酸检测试剂注册技术审评要点》指出:假病毒颗粒或天然病毒可作为2019新型冠状病毒核酸质控对照品，而不是使用质粒作为其对照品，并为后期的病毒核酸诊断给予原则性指导。根据审评要点，本文总结出假病毒颗粒在诊断试剂开发中的几点作用。

一、作为最低检测限的确定

将含有该病毒RNA片段的假病毒颗粒梯度稀释于(与适用样本一致的)适当基质中，可用于进行最低检测限研究。要求每个浓度梯度最少重复三次检测，以100% 可检出的最低浓度水平作为估计检测限，在此浓度附近制备若干梯度浓度样品，每个浓度至少重复20次检测，将具有90% ~ 95% 阳性检出率的最低浓度水平作为确定的最低检测限。

二、作为阳性质控品

阳性质控品可用1 ~ 2个病毒株为代表，应含有天然的或人工合成的包含试剂盒可检测靶序列，假病毒则可以作为阳性质控品进行试验。假病毒颗粒可以作为分子诊断的阳性参考品，使得研发人员或用户可不再使用野生型病毒作为阳性对照，极大的降低了被野生型病毒二次感染的风险。

三、作为阴性参考品

阴性参考品则主要涉及对交叉反应的验证情况、注册技术审评要点中建议包括冠状病毒(HKU1、OC43、NL63、229E)、传染性非典型肺炎冠状病毒、MERS冠状病毒流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒等、传染性非典型肺炎冠状病毒、MERS冠状病毒可采用假病毒替代。

和信健康-假病毒颗粒

和信健康利用其独特的MS2载体构建的假病毒颗粒，完全包括国家卫健委《新型冠状病毒肺炎实验室检测技术指南(第四版)》中要求新型冠状病毒(SARS-COV-2)的检测靶标ORF1ab序列，N基因全长，及S基因主要区段，适用于新型冠状病毒相关分子诊断产品性能评估与质量控制。通过模拟临床阳性样本，实现对样本提取，RNA逆转录，PCR反应体系扩增等实验环节的质量监控。

【型号信息】

以已发布新型冠状病毒肺炎参比序列(NC_045512.2)为模版序列，本产品包含新冠病毒靶序列详细信息如下:

【产品特点】

1.高效:高效多拷贝转录目标靶序列RNA

2.稳定:表达载体同步构建MS2噬菌体衣壳蛋白基因，产物复合体稳定性好

3. 安全:样品完全失去感染活性

4.适用性强:产品完全包括CDC关于新型冠状病毒的检测靶标ORF1ab序列，同时包括N基因全长，及S基因主要区段，适用于所有以CDC推荐靶标为检测标的物的产品的质控及研究。